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Le laboratoire de chromatographie et Rf est une simulation de chimie analytique en 3D de la chromatographie sur papier et sur couche mince (CCM). Une bande de cellulose tachée par un mélange le long de sa ligne de base au crayon suspend une chambre de développement en verre scellée, son bord inférieur trempant dans un bain de solvant de phase mobile. Alors que l'action capillaire tire le front de solvant vers le haut (ds), les composants du mélange se partagent différemment entre le papier stationnaire polaire et le solvant mobile ascendant, se séparant en bandes colorées distinctes (dx). Les étudiants peuvent basculer entre les pigments de feuilles d'épinard, l'encre de marqueur noir et les colorants alimentaires, régler la polarité du solvant, cliquer sur n'importe quelle tache séparée et faire glisser une règle centimétrique graduée en 3D à côté du chromatogramme pour vérifier sur Rf = dx / ds.
Le facteur de rétention (Rf) est calculé en divisant la distance parcourue par le centre d'une tache de soluté à partir de l'origine de la ligne de base (dx) par la distance parcourue par le front de solvant à partir de la même ligne de base (ds) : Rf = dx / ds. Puisqu'une tache ne peut jamais dépasser le front de solvant, le Rf est toujours compris entre 0 et 1.
La mine de crayon est faite de graphite insoluble, qui reste fixe sur le papier lorsque le solvant monte. Si la ligne de base était tracée au stylo, les colorants de l'encre se dissoudraient dans la phase mobile ascendante et remonteraient la bande, contaminant le chromatogramme de l'échantillon.
Le bêta-carotène est un hydrocarbure non polaire sans groupes hydroxyle ou carbonyle pour former des liaisons hydrogène avec le papier de cellulose polaire, de sorte qu'il passe presque tout son temps dissous dans le solvant organique ascendant et se déplace avec un Rf proche de 0,9.
Si le niveau de solvant liquide dans le bécher est plus élevé que la tache d'échantillon sur la ligne de base, le mélange de pigments se dissoudra directement dans le bain au fond de la cuve au lieu d'être transporté le long de la bande de papier par action capillaire.
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