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Laboratoire de chromatographie et Rf

À propos de cette simulation

Le laboratoire de chromatographie et Rf est une simulation de chimie analytique en 3D de la chromatographie sur papier et sur couche mince (CCM). Une bande de cellulose tachée par un mélange le long de sa ligne de base au crayon suspend une chambre de développement en verre scellée, son bord inférieur trempant dans un bain de solvant de phase mobile. Alors que l'action capillaire tire le front de solvant vers le haut (ds), les composants du mélange se partagent différemment entre le papier stationnaire polaire et le solvant mobile ascendant, se séparant en bandes colorées distinctes (dx). Les étudiants peuvent basculer entre les pigments de feuilles d'épinard, l'encre de marqueur noir et les colorants alimentaires, régler la polarité du solvant, cliquer sur n'importe quelle tache séparée et faire glisser une règle centimétrique graduée en 3D à côté du chromatogramme pour vérifier sur Rf = dx / ds.

Ce que les élèves peuvent explorer

  • Sélectionnez les pigments foliaires et cliquez sur chacune des quatre taches séparées de bas en haut : chlorophylle b, chlorophylle a, xanthophylle et bêta-carotène.
  • Glissez la règle centimétrique 3D jaune à côté de la bande de papier de sorte que sa marque 0 cm s'aligne sur la ligne de base au crayon, puis lisez dx et ds pour vérifier que Rf = dx / ds.
  • Modifiez la progression de l'élution de 30% à 95% et confirmez que tandis que dx et ds augmentent tous deux à mesure que le solvant monte, leur rapport Rf reste constant.
  • Ajustez le curseur de polarité du solvant et observez comment les pigments polaires modifient leur distance de migration par rapport à la tache de carotène non polaire.
  • Changez le type de mélange pour l'encre de marqueur noir ou les colorants alimentaires afin d'identifier quel composant de colorant est le plus soluble dans la phase mobile.

Objectifs d'apprentissage

  1. 1Calculez le facteur de rétention Rf = dx / ds à partir de la distance parcourue par une tache de soluté (dx) et du front de solvant (ds).
  2. 2Expliquez comment la chromatographie sépare les molécules en fonction de la concurrence entre l'adsorption sur la phase stationnaire et la solubilité dans la phase mobile.
  3. 3Expliquez pourquoi la ligne d'origine de la ligne de base sur une bande de chromatographie doit être tracée au crayon (graphite) plutôt qu'à l'encre.
  4. 4Prédisez pourquoi les valeurs de Rf restent constantes pour un composé, une phase stationnaire et un système de solvants donnés, peu importe la distance parcourue par le front de solvant.

Questions fréquentes des enseignants

Comment calcule-t-on la valeur Rf en chromatographie ?

Le facteur de rétention (Rf) est calculé en divisant la distance parcourue par le centre d'une tache de soluté à partir de l'origine de la ligne de base (dx) par la distance parcourue par le front de solvant à partir de la même ligne de base (ds) : Rf = dx / ds. Puisqu'une tache ne peut jamais dépasser le front de solvant, le Rf est toujours compris entre 0 et 1.

Pourquoi la ligne de base sur le papier de chromatographie doit-elle être tracée au crayon ?

La mine de crayon est faite de graphite insoluble, qui reste fixe sur le papier lorsque le solvant monte. Si la ligne de base était tracée au stylo, les colorants de l'encre se dissoudraient dans la phase mobile ascendante et remonteraient la bande, contaminant le chromatogramme de l'échantillon.

Pourquoi le bêta-carotène se déplace-t-il près du front de solvant dans la chromatographie des feuilles ?

Le bêta-carotène est un hydrocarbure non polaire sans groupes hydroxyle ou carbonyle pour former des liaisons hydrogène avec le papier de cellulose polaire, de sorte qu'il passe presque tout son temps dissous dans le solvant organique ascendant et se déplace avec un Rf proche de 0,9.

Pourquoi le bain de solvant doit-il se trouver sous la tache de la ligne de base au départ ?

Si le niveau de solvant liquide dans le bécher est plus élevé que la tache d'échantillon sur la ligne de base, le mélange de pigments se dissoudra directement dans le bain au fond de la cuve au lieu d'être transporté le long de la bande de papier par action capillaire.

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