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Laboratório de Cromatografia e Rf

Sobre esta simulação

O Laboratório de Cromatografia e Rf é uma simulação de química analítica em 3D de cromatografia em papel e em camada delgada (TLC). Uma tira de celulose com um ponto de mistura ao longo de sua linha de base a lápis pendura-se dentro de um recipiente de vidro vedado com sua borda inferior mergulhada em um reservatório de solvente de fase móvel. À medida que a capilaridade puxa a frente do solvente para cima (ds), os componentes da mistura dividem-se de maneira diferente entre o papel estacionário polar e o solvente móvel ascendente, separando-se em bandas coloridas distintas (dx). Os alunos podem alternar entre Pigmentos de Folha de Espinafre, Tinta de Marcador Preto e Corantes Alimentares, ajustar a polaridade do solvente, clicar em qualquer ponto separado e arrastar uma régua de centímetros graduada em 3D ao lado do cromatograma para verificar Rf = dx / ds.

O que os alunos podem explorar

  • Selecione Pigmentos Folhares e clique em cada um dos quatro pontos separados de baixo para cima: Clorofila b, Clorofila a, Xantofila e Beta-Caroteno.
  • Arraste a régua amarela de centímetros em 3D ao lado da tira de papel para que sua marca de 0 cm se alinhe com a linha de base a lápis, depois leia dx e ds para verificar Rf = dx / ds.
  • Altere o progresso da Eluição de 30% para 95% e confirme que, embora tanto dx quanto ds cresçam à medida que o solvente sobe, sua razão Rf permanece constante.
  • Ajuste o controle deslizante de Polaridade do solvente e observe como os pigmentos polares mudam sua distância de migração em relação ao ponto de caroteno não polar.
  • Mude o Tipo de mistura para Tinta de Marcador Preto ou Corantes Alimentares para identificar qual componente do corante é mais solúvel na fase móvel.

Objetivos de aprendizagem

  1. 1Calcule o fator de retenção Rf = dx / ds a partir da distância percorrida por um ponto de soluto (dx) e da frente do solvente (ds).
  2. 2Explique como a cromatografia separa as moléculas com base na competição entre a adsorção na fase estacionária e a solubilidade na fase móvel.
  3. 3Explique por que a linha de origem da linha de base em uma tira de cromatografia deve ser desenhada a lápis (grafite) em vez de caneta.
  4. 4Preveja por que os valores de Rf permanecem constantes para um dado composto, fase estacionária e sistema de solventes, independentemente de quão longe a frente do solvente percorra.

Perguntas frequentes dos professores

Como você calcula o valor de Rf na cromatografia?

O fator de retenção (Rf) é calculado dividindo a distância percorrida pelo centro de um ponto de soluto a partir da origem da linha de base (dx) pela distância percorrida pela frente do solvente a partir da mesma linha de base (ds): Rf = dx / ds. Como um ponto nunca pode ultrapassar a frente do solvente, o Rf está sempre entre 0 e 1.

Por que a linha de base no papel de cromatografia deve ser desenhada a lápis?

O grafite do lápis é feito de grafite insolúvel, que permanece fixo no papel quando o solvente sobe. Se a linha de base fosse desenhada com caneta, os corantes da tinta se dissolveriam na fase móvel ascendente e subiriam pela tira, contaminando o cromatograma da amostra.

Por que o beta-caroteno viaja perto da frente do solvente na cromatografia de folhas?

O beta-caroteno é um hidrocarboneto não polar sem grupos hidroxila ou carbonila para formar ligações de hidrogênio com o papel de celulose polar, de modo que passa quase todo o seu tempo dissolvido no solvente orgânico ascendente e se move com um Rf próximo de 0,9.

Por que o reservatório de solvente deve ficar abaixo do ponto da linha de base no início?

Se o nível do solvente líquido no béquer for superior ao ponto da amostra na linha de base, a mistura de pigmentos se dissolverá diretamente no reservatório na parte inferior do tanque em vez de ser carregada para cima na tira de papel por ação capilar.

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