Laboratorio de Cromatografía y Rf

El Laboratorio de Cromatografía y Rf es una simulación analítica de química en 3D de cromatografía en papel y en capa fina (TLC). Una tira de celulosa manchada con una mezcla a lo largo de su línea base de lápiz cuelga dentro de una cámara de desarrollo de vidrio sellada con su borde inferior sumergido en un charco de disolvente de fase móvil. A medida que la acción capilar arrastra el frente del disolvente hacia arriba (ds), los componentes de la mezcla se partitionan de manera diferente entre el papel estacionario polar y el disolvente móvil ascendente, separándose en bandas de colores distintas (dx). Los estudiantes pueden cambiar entre Pigmentos de Hojas de Espinaca, Tinta de Marcador Negro y Colorantes Alimentarios, ajustar la polaridad del disolvente, hacer clic en cualquier punto separado y arrastrar una regla de centímetros graduada en 3D al lado del cromatograma para verificar Rf = dx / ds.

• Seleccione Pigmentos Foliares y haga clic en cada uno de los cuatro puntos separados de abajo hacia arriba: Clorofila b, Clorofila a, Xantofila y Beta-Caroteno.
• Arrastre la regla amarilla de centímetros 3D al lado de la tira de papel para que su marca de 0 cm se alinee con la línea base de lápiz, luego lea dx y ds para verificar Rf = dx / ds.
• Cambie el progreso de elución del 30% al 95% y confirme que, aunque tanto dx como ds crecen a medida que el disolvente asciende, su relación Rf permanece constante.
• Ajuste el control deslizante de polaridad del disolvente y observe cómo los pigmentos polares cambian su distancia de migración en relación con el punto de caroteno no polar.
• Cambie el tipo de mezcla a Tinta de Marcador Negro o Colorantes Alimentarios para identificar qué componente de tinte es más soluble en la fase móvil.

1. 1Calcule el factor de retención Rf = dx / ds a partir de la distancia recorrida por un punto de soluto (dx) y el frente del disolvente (ds).
2. 2Explique cómo la cromatografía separa las moléculas basándose en la competencia entre la adsorción a la fase estacionaria y la solubilidad en la fase móvil.
3. 3Explique por qué la línea de origen de la línea base en una tira cromatográfica debe dibujarse con lápiz (grafito) en lugar de tinta.
4. 4Prediga por qué los valores de Rf se mantienen constantes para un compuesto dado, una fase estacionaria y un sistema de disolventes, independientemente de qué tan alto suba el frente del disolvente.

Preguntas frecuentes de los docentes