مختبر الكروماتوغرافيا وعامل الاستبقاء Rf

مختبر الكروماتوغرافيا وعامل الاستبقاء Rf هو محاكاة كيميائية تحليلية ثلاثية الأبعاد لكروماتوغرافيا الورق والطبقة الرقيقة (TLC). يعلق شريط من السليلوز موضوع عليه بقعة من الخليط على طول خط أساس بالقلم الرصاص داخل غرفة تطوير زجاجية محكمة الإغلاق مع حافته السفلية مغمورة في بركة مذيب الطور المتحرك. بينما ترتفع جبهة المذيب بفعل العمل الشعري (ds)، تتوزع مكونات الخليط بشكل مختلف بين ورق الطور الثابت القلوي ومذيب الطور المتحرك الصاعد، لتنفصل إلى نطاقات ملونة مميزة (dx). يمكن للطلاب التبديل بين أصباغ أوراق السبانخ، وحبر القلم الأسود، وأصباغ الطعام، وضبط قطبية المذيب، والنقر على أي بقعة منفصلة، وسحب مسطرة سنتيمترية متدرجة ثلاثية الأبعاد بجوار مخطط الكروماتوغرافيا للتحقق من أن Rf = dx / ds.

• حدد أصباغ الأوراق وانقر على كل من البقع الأربع المنفصلة من الأسفل إلى الأعلى: كلوروفيل ب، كلوروفيل أ، كسانتوفيل، وبيتا كاروتين.
• اسحب مسطرة السنتيمتر الصفراء ثلاثية الأبعاد بجوار الشريط الورقي بحيث يتوافق علامة 0 سم مع خط الأساس بقلم الرصاص، ثم اقرأ dx وds للتحقق من أن Rf = dx / ds.
• قم بتغيير تقدم الاستخلاص من 30% إلى 95% وتأكد من أنه بينما ينمو كل من dx وds مع ارتفاع المذيب، تظل نسبتهما Rf ثابتة.
• اضبط شريط قطبية المذيب وراقب كيف تغير الأصباغ القطبية مسافة هجرتها نسبة إلى بقعة الكاروتين غير القطبية.
• قم بتغيير نوع الخليط إلى حبر القلم الأسود أو أصباغ الطعام لتحديد أي مكون صبغي هو الأكثر ذوبانًا في الطور المتحرك.

1. 1حساب معامل الاستبقاء Rf = dx / ds من المسافة التي تقطعها بقعة المذاب (dx) وجبهة المذيب (ds).
2. 2شرح كيف تفصل الكروماتوغرافيا الجزيئات بناءً على المنافسة بين الامتزاز على الطور الثابت والذوبان في الطور المتحرك.
3. 3شرح سبب وجوب رسم خط أصل خط الأساس على شريط الكروماتوغرافيا بالقلم الرصاص (الجرافيت) وليس بالحبر.
4. 4التنبؤ بسب تباين أو ثبات قيم Rf لمركب معين، والطور الثابت، ونظام المذيب بغض النظر عن مدى تقدم جبهة المذيب.

أسئلة يطرحها المعلمون